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TrkA基因作為綿羊產(chǎn)羔數(shù)性狀的分子標記及其應用

2020-12-15 19:14| 發(fā)布者: 蘭大技術(shù)轉(zhuǎn)移| 查看: 166| 評論: 0

摘要: 技術(shù)領域本發(fā)明屬于綿羊分子標記篩選技術(shù)領域,具體涉及TrkA基因作為綿羊產(chǎn)羔性狀的分子標記及其應用。本發(fā)明的分子標記克隆自綿羊TrkA基因。背景技術(shù)傳統(tǒng)育種方法中,對家畜性狀選擇的方法多依賴于家畜的表型,這種 ...

技術(shù)領域

本發(fā)明屬于綿羊分子標記篩選技術(shù)領域,具體涉及TrkA基因作為綿羊產(chǎn)羔性狀的分子標記及其應用。本發(fā)明的分子標記克隆自綿羊TrkA基因。

背景技術(shù)

傳統(tǒng)育種方法中,對家畜性狀選擇的方法多依賴于家畜的表型,這種方法在大家畜選育中需要豐富的經(jīng)驗和長達幾十年時間。對于一些由微效多基因控制的低遺傳力的數(shù)量性狀,例如綿羊產(chǎn)羔性狀,不僅由母羊自身遺傳因素決定,且受到不同環(huán)境和飼養(yǎng)條件的影響,常規(guī)育種方法遺傳改良進展緩慢。形態(tài)學標記、細胞學標記、生物化學標記以及免疫學標記雖然已經(jīng)在優(yōu)良種畜選育中進行應用,但由于這些標記的多態(tài)性低和信息量小,且是對基因的間接反映,受到基因與環(huán)境互作的影響比較大,在生產(chǎn)實踐中有很大的局限性。隨著分子生物學技術(shù)的發(fā)展,尤其是分子遺傳標記技術(shù)的發(fā)展和完善,利用與目標性狀緊密連鎖的分子遺傳標記,對目標性狀進行跟蹤性選擇,減少育種過程中選擇的盲目性,并可以進行早期選育,極大提高育種效率。

TrkA(Tyrosine Kinase A)是由原癌基因trk編碼的酪氨酸蛋白激酶受體,神經(jīng)生長因子(NGF)以二聚體的形式與其相結(jié)合,誘導TrkA酪氨酸殘基處磷酸化,通過激活磷脂酶Cγ(PLCγ)→磷脂酶肌醇激酶(PI3K)→銜接蛋白(Shc)信號通路將胞外信號傳遞到細胞核(馬永和,2010)。TrkA不僅介導NGF對神經(jīng)系統(tǒng)中膽堿能神經(jīng)元的分化和發(fā)育的調(diào)控(CountsS等,2005),而且在生殖系統(tǒng)也發(fā)揮功能,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在人、鼠、金倉鼠、綿羊和山羊等動物卵泡均有TrkA基因表達(馬永和等,2010)。不同發(fā)育階段卵泡中TrkA表達豐度不同,豬的原始卵泡和初級卵泡的卵泡細胞和卵母細胞不表達TrkA,但在二級卵泡和三級卵泡的卵泡細胞及卵母細胞中有大量表達(Levanti MB等,2005)。NGFTrkA參與早期卵泡的裝配、顆粒細胞的增殖、卵母細胞的成熟及排卵等過程(Dissen GA等,2001)。在體外,NGF還可以促進牛腔前卵泡的發(fā)育(李海等,2005)和豬卵母細胞成熟(陸晨等,2013)NGF-TrkA復合物對輸卵管和子宮發(fā)育亦發(fā)揮重要作用,TrkA在子宮內(nèi)膜細胞、腺細胞、基質(zhì)細胞、輸卵管黏膜上皮細胞均有表達,且卵泡期,輸卵管中表達量顯著高于卵巢(馬永和等,2010)。

現(xiàn)有文獻表明,TrkA基因參與了動物繁殖調(diào)控過程,尤其是卵子發(fā)生和卵泡發(fā)育。因此,尋找該基因中變異位點,通過與產(chǎn)羔性狀間的關(guān)聯(lián)分析,是進行分子遺傳標記輔助選擇的基礎。此發(fā)明開展了綿羊TrkA基因部分基因組序列克隆和SNP篩查、檢測及與產(chǎn)羔數(shù)性狀關(guān)聯(lián)分析,以提高繁殖力母羊選擇的準確性,可望綿羊加快育種進程。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷,特別是現(xiàn)有綿羊育種周期長、選擇準確性低、無法進行早期選育等技術(shù)缺陷,提供一種提高綿羊產(chǎn)羔數(shù)性狀關(guān)聯(lián)的分子標記作為輔助選擇的手段。本發(fā)明的核心在于通過PCR-RFLP技術(shù)對候選個體的TrkA基因部分序列進行基因型分析,為綿羊產(chǎn)羔數(shù)性狀檢測提供一種輔助選擇的遺傳標記。

技術(shù)負責人: 李萬宏 草地農(nóng)業(yè)科技學院

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