技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及蒺藜苜蓿microRNA-SSR分子標(biāo)記引物及在苜蓿品種鑒定中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

根據(jù)我國《植物新品種保護(hù)條例》規(guī)定：植物新品種必須具備特異性、一致性和穩(wěn)定性(簡稱DUS)，才能授予植物新品種權(quán)。DUS測試技術(shù)體系包括以植物農(nóng)藝學(xué)形態(tài)特征測試為主導(dǎo)的傳統(tǒng)測試技術(shù)和對基因型測試的分子輔助技術(shù)兩部分。隨著我國植物育種和種子貿(mào)易的發(fā)展，對植物新品種的保護(hù)及育種家權(quán)益的保障的重要性日益凸顯。

苜蓿是全球種植面積最大的豆科牧草，具有廣泛的生態(tài)適應(yīng)性、穩(wěn)定的生產(chǎn)力及較高的營養(yǎng)價(jià)值，具有“牧草之王”的稱號，在我國農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)和生態(tài)經(jīng)濟(jì)建設(shè)中發(fā)揮著巨大作用。近年來，隨著畜牧業(yè)的快速發(fā)展，我國在苜蓿品種培育和審定工作方面也取得了重要進(jìn)展。目前，苜蓿新品種的審定和品種真實(shí)性的鑒定方法主要是通過田間種植，根據(jù)其形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行鑒別。但這種方法費(fèi)時(shí)費(fèi)力、容易受環(huán)境和主觀因素的影響。另外，由于苜蓿骨干親本的集中使用，從而導(dǎo)致育成品種間性狀差異日趨狹窄，使得通過形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行品種鑒定變得更加困難。因此，建立一套快速、精確、廉價(jià)的苜蓿品種鑒定技術(shù)，顯得非常必要。

近年來，以PCR技術(shù)為基礎(chǔ)的分子標(biāo)記技術(shù)，如RAPD、SCAR、SSR、ILP等，已經(jīng)被廣泛用于植物品種鑒定。MicroRNA(miRNA)是生物體內(nèi)普遍存在的非編碼、長度約16～29nt的小分子RNA，在轉(zhuǎn)錄后水平通過介導(dǎo)靶mRNA降解或翻譯抑制調(diào)控基因表達(dá)，從而作為一類重要調(diào)控因子參與植物整個(gè)生長發(fā)育進(jìn)程調(diào)控。根據(jù)miRNA序列開發(fā)出的microRNA-SSR(miRNA-SSR)分子標(biāo)記較之其它類型的分子標(biāo)記具有功能相關(guān)性、基因組分布廣泛、多態(tài)性豐富、重現(xiàn)性強(qiáng)以及廣泛的通用性等特點(diǎn)，可用于品種鑒定、系統(tǒng)發(fā)育分析、遺傳多樣性分析以及遺傳連鎖作圖等方面。作為一種新型的分子標(biāo)記，迄今為止，miRNA-SSR標(biāo)記主要在模式植物水稻中得到開發(fā)和應(yīng)用，但在非模式植物苜蓿中，miRNA-SSR引物的開發(fā)以及在品種鑒定中的應(yīng)用尚未見報(bào)道。因此，在全基因組水平開發(fā)蒺藜苜蓿miRNA-SSR分子標(biāo)記并研究其在其近緣種苜蓿鑒定中的應(yīng)用，對苜蓿品種進(jìn)行高效、快速的鑒定以及進(jìn)行分子標(biāo)記輔助育種具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

蒺藜苜蓿miRNA-SSR分子標(biāo)記引物，所述分子標(biāo)記引物包括如實(shí)施例所述10對。

蒺藜苜蓿miRNA-SSR分子標(biāo)記引物在苜蓿品種鑒定中的應(yīng)用。

技術(shù)負(fù)責(zé)人： 劉文獻(xiàn) 草地農(nóng)業(yè)科技學(xué)院